Gēnu elektroporators

SCIENTZ-2CS – gēnu elektroporators

SCIENTZ-2CS gēnu elektroporators sastāv no galvenās ierīces, gēnu elektroporācijas kivetes un specializētiem savienojuma kabeļiem. Tā izmanto elektroporāciju, lai ievadītu DNS kompetentajās šūnās, augu un dzīvnieku šūnās, kā arī rauga šūnās. Salīdzinājumā ar citam transformācijas metodēm tā nodrošina augstu atkārtojamību, augstu efektivitāti, vienkāršu lietošanu un precīzu vadību, un tā kā elektroporācija ir fizikāls, nevis ķīmisks vai vīrusu process, tā rada niecīgu genotoksicitāti.

Darbības princips

Elektroporācija (šūnu elektroporācija) ievada ekzogēnās makromolekulas – DNS, RNS, siRNS un olbaltumvielas, kā arī nelielas molekulas – šūnās. Īsa, spēcīga elektriskā lauka ietekmē šūnas membrāna īslaicīgi kļūst caurlaidīga, ļaujot lādētām ekzogēnām vielām to šķērsot līdzīgi elektroforézei. Tā kā fosfolipīdu dubultslānim ir augsta pretestība, lielāko daļu pielītota sprieguma uzņem pati membrāna, kamēr citoplazmā nokļūst tikai neliels spriegums; spriegums pie kāola membrānas ir tuvu nullei, kas notur genotoksicitāti niecīgā līmenī. Tā kā process ir fizikāls, nevis ķīmisks, šūnas virsmas molekulārās īpašības to maz ietekmē, tāpēc SCIENTZ-2CS var izmantot gandrīz jebkuram šūnu tipam, un rezultātus var viegli kvantitatīvi novērtēt.

Priekšrocības

• Augsta efektivitāte – īss transformācijas laiks, augsts konversījas rādītājs, maza pielaide
• Inteliģenta atmiņa – eksperimentālos parametrus var saglabāt turpmākai lietošanai
• Precīza vadība – mikroprocesora vadīta impulsa izlāde
• Estētisks, integrēts dizains – intuitīvs skārienekrāns, vienkārša lietošana

Tehniskie parametri

• Impulsa veids: eksponenciāla samazināšanās
• Augstsprieguma izeja: 401–3000 V
• Zemsprieguma izeja: 50–400 V
• Augstsprieguma kapacitāte: 10 / 25 / 35 / 50 / 60 µF
• Zemsprieguma kapacitāte: 50–1560 µF, ar 25 µF soli
• Paralēlā pretestība: 50–1650 Ω, ar 50 Ω soli
• Vadības sistēma: mikrodatora vadība, regulējama RC laika konstante
• Galvenās ierīces izmēri: 40 × 30 × 20 cm; neto svars 5,5 kg

Standarta sistēmas konfigurācija

Galvenā ierīce, gēnu elektroporācijas kivete, specializēti savienojuma kabeļi.

Orientējoši elektroporācijas parametri pēc organisma

Piezīme: parametri dažādās laboratorijās atšķiras un ir sniegti tikai orientējošos nolūkos.

SCIENTZ-2CS gēnu elektroporatora lietojumi

• Baktēriju, rauga un citu mikroorganismu elektroporācija
• Zīdītāju šūnu, augu audu un protoplastu transfekcija
• Šūnu hibridizācija un gēnu saplūšana
• Marķiera gēnu ievadīšana marķēšanas un indikācijas nolūkos
• Zāļu, olbaltumvielu, antivielu un citu molekulu ievadīšana šūnas struktūras un funkcijas pētīšanai

Tipiskas lietojuma jomās iekļauj pārtikas rūpniecību, lauksaimniecības zinātnes, veterināro pētniecību un bioinženieriju.